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 전체 > Molecular Biology-RNA > Small RNA Analysis
조회 688  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 RNA
알karan(일반인)  | 01.26 21:18

upload_image

 Melan a cell 조직에서 Trizol을 사용하여 RNA를 추출하였습니다.
조직 lysis 후 , Trizol에 chloroform을 넣어 vortexing하여 섞은 후, 몇 분 방치 한후 13000rpm 에서 10분간 centrifuge하였습니다. 4도씨에 1-3 시간 보관하고 (70% 에탄올로 washing 13000rpm 에서 10분간 centrifuge 3 번 하였습니다). 5분 건조하고 0.1% DEPC 20 μl 넣었습니다 

RNA를 측정하였을때

A260/A280은 1.9정도 나오는데, 

A260/A230은 2.3정도 나옵니다 ㅠㅠ.  cDNA 합성해도 될까요?


A260/A280 과 A260/A230 값이 얼마정도 좋아요? 
어떻게 해야 해결될지 고수님들 의견 부탁드립니다 ㅠㅠ

#RNA
 
#Trizol
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리clickclick  |  01.27 11:00  

1.6~2.0이 나오면 purity가 정말 좋다고 본다고 배웠어요. 

cDNA 합성 하세요!! 
 

제가 키트로 뽑았을 때, 아래 정도로 나왔으니깐, 

upload_image

지금 충분히 잘 뽑힌것 같아요. (trizol로!!)

농도가 높아서 희석해서 사용하셔도 되겠어요~ 

대왕개구리SPEED  |  01.27 11:59  

- spec.으로 RNA quality를 확인하기에는 한계가 있습니다.

 

- 숫자 만으로 본다면 괜찮게 나온것 같습니다.

 

- 나온 숫자가 RNA quality를 100% 반영하지 못하기 때문에 전기영동으로 확인해보면 더 좋을 것으로 보입니다.

알karan  |  01.27 14:07  

clickclick 님 

갑사합니다

알karan  |  01.27 14:08  

SPEED  님 

알겠습니다 

감사합니다. 

chWK  |  01.27 17:43   

저희 랩실에서는 260/280과 260/230이 1.9~2.0이고, gel electriphoresis를 해서 280 band와 260 band가 균일하게 나오면 cDNA 합성하여 사용하고 있습니다.

윗분 말씀처럼, 전기영동으로 band 확인 후, 사용 여부를 결정하시는 것이 좋을 것 같습니다.

알karan  |  02.03 18:06  

chWK 님 알겠습니다

감사합니다

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