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질문 HPLC 컬럼 관련하여 질문드립니다.
올챙이nounou(대학원생)  | 01.25 16:48

현재 올리고당 관련 연구를 맡고 있는 대학원생인데요, 연구 중간에 투입되어 아직 기기에 대해 모르는 부분이 많아 질문드립니다.

 

Aminex HPX-87H (300 x 7.8 mm) 컬럼을 사용하고 있고 이동상은 0.005M H2SO4, 유속은 0.6mL/min으로 하고 있습니다. 

 

1. 가이드라인북에는 cleaning solvent 1) 5% CH3CN in 0.005M H2SO4 2) 30% CH3CN in 0.005M H2SO4 // Duration 1) 4hr 2) 12hr 3) run mobile phase until steady baseline 이라고 나와있는데, duration에 3번 항목처럼 적혀있는거면 꼭 ACN이 함유된 용매로 cleaning 해줄 필요 없이 이동상(황산)으로만 워싱해줘도 괜찮은건가요? 황산에 ACN이 첨가됨으로써 어떤 차이가 있는건지 궁금합니다.

 

2. 또한, 다른 자료를 찾아보면 backwashing을 하라는 분도 계셔서 헷갈리는데 정확한 워싱 방법이 무엇인지 궁금합니다.

#hpx-87h
 
#column
 
#hplc
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리cslee  |  01.25 22:19  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

일단 ACCN 은 안하셔도 됩니다

H2SO4 희석용매 만 해도되는데 정확하게 컬럼구입시 

INSTRUCTION MANUAL데로 하셔야 합니다, 

 

itoh@ct-k.com  |  02.22 16:04   

폴리머타입의 컬럼으로 ACN 사용은 하지 않는것이 좋습니다.

컬럼이 심하게 오염되었을때 마지막으로 세척하는 방법이라고 생각하시면 좋을것 같습니다.

폴러머베이스 컬럼들은 사용하는 용매가 아닌 다른 유기용매등이 들어가게 되면 충진제 평형상태가 깨져서 분리능이 떨어질수 있습니다.

유기용매는 사용하면 안된다고 생각하시고 사용하시는것이 좋습니다.

세척은 100% 물로만 하세요.

Backwashing 도 심한 오염으로 압력이 높아져서 마지막 세척법이라 생각하시고 하시는 방법이라고 생각하시면 됩니다.

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