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이미지만 보면 thawing이 제대로 안 되고 cell이 다 죽은 것 같은데 자라는 게 맞나요?
atcc이나 구글에 세포 사진 참고하세요.
예전에 출처를 알수없는 세포 받았을때 딱 저런 모양이었습니다.
세포가 많으면 겹쳐서 자랄 수도 있지만, 저렇게 뭉쳐서 자라는건 정상 아닙니다.
- 첨부 사진은 배양 중인가요?
- stock의 문제로 보이며 1차 배양 후 sub culture 할 때 안풀리는것은 제거하고
배양을 해서 사용하면 됩니다.
저같은 경우에 HepG2는 RPMI +10% FBS로 배양을 했었고,
분양 받는 곳 마다 뭉치는게 주 인 곳도 있고 안뭉치는 애들이 주 곳도 있었는데 두가지 경우 모두 seeding density 를 낮게 해서 배양 사이클을 좀 길게 가져가면 덜 뭉쳐서 올라올거에요.
그리고 뭉치는게 많을 경우에도 계대시에 TE 짧게 처리후 뜨는 애들 과 좀 더 길게 처리후 바닥에 붙은 애들 따로 모아서 키워보셔도 셀렉션이 어느정도 가능 하실거에요. 근데 사진으로 보여주신거 자체가 컨디션이 좋아보이지는 않네요..
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레벨2
cheer up cell culture
(대학원생)
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23.01.17 17:28
답변 감사합니다. 사실 전에 한 번 cell density를 낮춘 상태에서 배양했을 땐 이러진 않았습니다..
이번엔 hepg2의 경우 confluency가 배양 속도에 영향을 준다고 해서 density를 높혀본 건데.. 그래서 이런가 싶기도 하고요 ㅜㅜ
적절한 density를 고려해보겠습니다.
첨부한 사진은 낮은 density에서 2주 정도 배양한 hepg2의 morphology인데
괜찮은지 봐주실 수 있으실까요?
사진 첨부주신거를 늦게 봤네요 죄송합니다 ㅎㅎ..
음 첨부주신 사진도 그렇고 글에 같이 올려주신 사진도 보면 모양이 제대로 못나오고 있는 싱글셀들이 꽤 많아보이네요..그래도 처음에 올려주셨던 사진 보다는 좋아보이는것 같습니다.
음 근데 낮은 덴시티로 셀 깔고나서 2주를 키우신걸까요? 2주동안 계대를 한번도 안할정도는 좀 심하게 덴시티가 낮을거 같습니다.
음 우선은 근데 덴시티를 너무 내리지는 마시고 셀 상태를 좋게 하는게 먼저일거 같아서 저라면 우선은 적정 덴시티로 두번정도 계대 넘긴 후에 다시 확인을 할거 같아요. 싱글셀로 쪼갠다고 파이펫팅 너무 많이하는것도 좋지 않구요.
크게 도움은 안될수도 있지만 0.1% 젤라틴 코팅한 이후에 배양해보시는거도추천드립니다!