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- 사진에 보이는 4 x 2 well의 희석 배수가 어땋게 되나요?
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레벨1
뿌우
(대학원생)
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23.01.06 15:46
네 선생님 24well에 MDCK 1X10^5cells/well 로 seeding후 A1well부터 10^-2~10^-7까지 희석했습니다. 사진에 보이는건 10^-5로 dilution한 결과입니다.
혹시몰라서 실험조건 말씀드리자면 MDCK seeding후 다음날 바이러스를 10^-2부터 10^-7까지 serum free MEM media에 TPCK를 1:1000으로 희석한 배지에 바이러스를 희석했습니다. 그리고 PBS 2번 washing후 100람다씩 각각 희석한 바이러스를 처리하고 15분마다 shaking 후 2% low melting agarose에 2XDMEM 섞고 TPCK를 1:1000비율로 넣어준 gel을 각 500람다씩 분주하여 overlay진행했습니다. 48시간정도 지난 후 4%paraformaldehyde로 fixing후 crystal violet으로 staining한 결과입니다.
- 우선 plate qualtiy를 확인해 보세요.
- 전체 well을 control로 배양해서 염색을 해보세요.
세포를 깔아줄때, 뭉치는 곳 없이 잘 깔아주었는지요?