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zymography 밴드
레벨1 판쵸비야 (대학원생)
자이모그래피 밴드가 반대로 나오는 경우는 무엇이 문제일까요?
48시간 반응해서 밴드가 안나와서 5일 동안 인큐베이션했구요
gel 농도와 buffer 농도는 이렇게 제조했고 런닝은 120v로 2시간 내렸어요
어쩔땐 잘 나오고 어쩔떈 안나오고 그러네요..
10% SDS-PAGE gel 0.1% (1mg/ml) gelatin |
Stacking gel |
||
D,W |
3 mL |
D,W |
3.08 mL |
1.5M Tris-HCl pH8.8 |
2.5 mL |
0.5M Tris-HCl pH6.8 |
1.25 mL |
30% POLYACRYAMIDE |
3.3 mL |
30% POLYACRYAMIDE |
0.67 mL |
10%SDS |
100 μL |
10%SDS |
50 μL |
10% APS |
100 μL |
10% APS |
50 μL |
TEMED |
10 μL |
TEMED |
5 μL |
Gelatin(10mg/ml) |
1 mL |
10X Developing buffer 37℃ 4-16시간 incubator |
||
500mM Tris(121.14) (pH7.5) |
30.285g |
|
2M NaCl(58.44) |
43.8g |
|
50mM CaCl(110.98) |
2.7745g |
|
D.W |
up to D.W 500ml |
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