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- colony 형성능이라는 질문이 잘못된 것 같은데 colony 형성능 자체만 따지면
1, 2 모두 vector 증폭이 가능하므로 colony가 잘 형성됩니다.
- cloning에서 1과 2 중에 1이 많이 나오지 않게 실험하는 것이 중요합니다.
- colning 실험에서 1과 2의 colony를 비교하면 1 < 2가 정상입니다.
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레벨1
킷캣트레비
(대학생)
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22.12.27 13:11
안녕하세요!
insert 유무와 관계없이 vector라면, 항생제 저항성 유전자 덕에 colony를 형성할 수 있다. 그러나 self-ligated vector는 일종의 '실수'여서 형질전환 실험 시 self-ligated vector가 형성하는 colony 개수가 제대로 ligation된 vector보다 적다.
이렇게 이해했는데, 옳게 이해한 걸까요?
- 형질전환 실험 시 self-ligated vector가 형성하는 colony 개수가 제대로 ligation된 vector보다 적다.
: "적다"보다 "적게해야 한다"입니다.
- 그냥 실험한다고 적게 나오는 것이 아니라 적게 나오도록 실험해야 하는 것이 cloning에서는 중요합니다.
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레벨1
킷캣트레비
(대학생)
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22.12.27 13:24
아 제가 전제를 달지 않았었네요!
"'올바르게 수행한 실험에서'라는 전제 조건이 있다면, self-ligated vector가 형성하는 colony 개수가 제대로 ligation된 vector보다 적다"라고 말할 수 있을까요?
- 올바르게 수행한 실험 = vector self form이 적게 나오도록 실험한으로 보면 맞습니다.
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레벨1
킷캣트레비
(대학생)
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22.12.27 13:41
답변 감사합니다! 정말 죄송한데, 한 가지만 더 여쭈어봅니다 ㅠㅠ
일부러 의도해서 1번(vector only)으로 형질전환하여 colony를 형성했을 때 2번(vector+insert)보다 colony 개수가 적은 이유가 무엇일까요?
1번과 2번 따로따로 실험했을 때로 가정하고자 합니다.
일부러 의도해서 1번(vector only)으로 형질전환하여 colony를 형성했을 때 2번(vector+insert)보다 colony 개수가 적은 이유가 무엇일까요?
보통 vector에 CIP처리를 하기 때문에 self-ligation이 안되는게 정상입니다.
하지만 CIP가 완벽하지 않기 때문에 self-ligation이 조금은 됩니다.
insert를 섞어주면 그나마 vector와 결합해서 circular plasmid가 만들어지고 colony를 만듭니다. 그래서 vector만 ligation한 것보다 colony가 많이 나(와야 합니다)옵니다,.
- 일부러 의도해서 1번(vector only)으로 형질전환하여 colony를 형성했을 때 2번(vector+insert)보다 colony 개수가 적은 이유가 무엇일까요?
: vector only가 self ligation인지 그냥 vector인지에 따라 달라집니다.
- 1번이 self ligation인 경우 1과 2는 비슷하게 colony가 나오고 그냥 vector인 경우는 ligation 효율이 100%가 나오지않기 때문에 colony 수는 1 > 2가 일반적인 경우입니다.