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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 SDS page gel 이 굳지 않습니다 ...
알도비에용(대학원생)  | 2022.12.09 09:26

실험실에 예전에 누군가가 사놨던 시약들로 웨스턴블롯 실험 구축중에 있습니다

없는 시약들은 다 주문했지만 원래 있던 시약은 유통기한이 다 지나긴 했어요..

bis acrylamide는 실험실에 없어 acrylamide만 30%로 녹여서  gel을 만들었고 나머지는 모두 조성대로 실험을 진행하였습니다..(bis acrylamide는 구매예정입니다..)

gel이 굳지는 않고 끈적끈적하게만 유리판에 달라붙어있는 상태입니다ㅜㅜ

TEMED와 APS의 농도를 높여도 보았고 실험실 온도도 높여 잘 굳는 환경을 조성해봤지만 10시간이 지나도 gel이 굳지않습니다ㅜㅜ

우선 의심가는것들은 bis acrylamide를 넣지않은 점, 상해버린 시약인데 ,,

선배님들은 gel이 굳지않는 이유를 어떻게 생각하시는지 여쭙고싶습니다

#western blot
 
#sds page gel
 
#protein
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2022.12.09   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- bis가 없으면 가교결합이 되지 않아 gel이 형성되지 않습니다.

개구리CBD 김선우  |  2022.12.09   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

bisacrylamide 를 안넣으면 polyacrylamide gel 이 형성되지 않습니다. 

실험에 적용되는 모든 물리 화학 원리를 다 알 수는 없지만, 그래도 어떤 재료가 어떤 기능을 하는지는 아셔야 할 듯합니다. 

ㅇㅇ  |  2022.12.09    
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

bis acrylamide 랑 acrylamide 섞인 액상용액 따로 팔아요! 그거 사서 사용하세요 많이 비싸지도 않아요. 아크릴아마이드 파우더 건강에 좋진 않아서..ㅠㅠ 

대왕개구리SPEED  |  2022.12.09   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- acrylamide 용액도 신경독성이 있습니다.

알도비에용  |  2022.12.09   

답변 감사합니다!
 

앞으로 열심히 공부해서 실험 성공해보겠습니다..!

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