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H&E staining 도와주세요 |
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저는 mouse skin 조직을 frozen section하여 H&E staining하는데..
H&E staining 조건이 잘 안잡힙니다.
eosin의 시간을 짧게 주어도 staining끝난 후 현미경상에서 관찰하면 조직전체가 eosin으로만 염색이 된 듯 분홍색 만 나타납니다.
hematoxylin의 색깔은 나타나지 않습니다.
시그마에서 파는 mayer''s hematoxylin을 사용했습니다.
hematoxlin 을 0.1%로 사용했는데 시약을 만들면 보리차색보다 조금 진한색을 띄고 염색을하고나면 아무런 색이 나타나지 않습니다.
eosin 염색하면 바로 분홍색으로 바뀌는데...
제가 시약을 잘못 준비한것인가요?
문제점이 무엇인지...도움 받고 싶습니다.
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hematoxylin 100% 몇번 deeping 하세요.
많이 하다 보면 감이란게 있는데 ..진하다 싶으면 HCl에 살짝 담그고, 연하다 싶으면 Deeping 두어번 더~
감을 익히세요 |
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잘 안보이신다는 그 슬라이드를 자일렌에 살짝 넣어서 커버글라스를 벗겨내고
염산(1%HCl)에 살짝 담근뒤에 다시 헤마톡실린에 염색하세요.
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제가 스킨만 2년동안했는데요~
헤마톡실린 30초
에오신10초 염색하면 이쁘게 잘 나옵니다. |
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 ip | 2019.12.31
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hematoxylin의 종류가 2가지 있는데 HCL 스텝을 거쳐야하는가 아닌가로 나뉘어 집니다. 시약을 잘 알아보고 다시 메소드 잡아보세요!!
저는 Hemato 1min -tap water- Eosin 1min -tap water 합니다.
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