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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 mtDNA 추출
올챙이똑똑해지자(대학생)  | 2022.12.05 11:53

안녕하세요. 

cell에서 mtDNA를 추출해 qPCR을 하려고 합니다.

사용 kit 는 DNeasy blood & tissue (qiagen)

사용 예정입니다.

제가 궁금한 것은 미토콘드리아 DNA 추출 키트를 사용하지 않더라도 추출이 가능할지가 궁금합니다.

혹시 사용해보신분들 계신지 여쭤보고 싶습니다.

#mtDNA
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리Marine  |  2022.12.05   

말씀하신 키트를 포함한 일반적인 gDNA 추출 방법을 사용하시면 세포내의 모든 DNA가 추출 되므로 (nuclear DNA + mt DNA), 미토콘드리아 DNA 도 당연히 얻으실 수 있습니다.

다만 미토콘드리아 DNA '만' 필요하신거라면 Mitochondria isolation kit 을 사용하시거나 differential centrifugation 등의 실험을 통해 미토콘드리아만 따로 얻어낸 다음 DNA를 추출 하셔야 합니다.

올챙이똑똑해지자  |  2022.12.06   

우선 답변 감사드립니다.

제가 궁금했던 점은 gDNA kit 만으로도 mtDNA를 추출하는데 무리 없이 정확히 가능할지 궁금하였습니다.

gDNA 용 추출 kit는 있기 때문에, 미토콘드리아 추출 키트를 또 사기엔 무리가 있어 궁금하였습니다.

그래서 gDNA 추출 KIT 만으로 mtDNA를 추출해보셨는지 궁금합니다

개구리Marine  |  2022.12.06   

네, qiagen 키트로 mtDNA도 추출 하실 수 있습니다.

 

미토콘드리아 DNA '만' 추출 하고자 하시는거라면 이 키트로 gDNA 추출에 앞서서 세포 내에서 미토콘드리아만 골라낼 수있는 실험 과정을 추가해주기만 하면 됩니다. 

그리고 이 경우에는 마지막에 elution buffer volume 만 20-50 ul 정도로 적게 해 주시면 됩니다.

아래 논문 참고하시길.. (실제 예시 논문입니다.)
https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0139253

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