안녕하세요 E. coli LB sub-culture 에 대해서 질문이 있습니다
두가지 균주가 혼합된 스톡을 분리하려고 합니다
1. 항생제 저항성 유전자(cmR)가 plasmid (정확히 phage origin)로 존재하는 균주
2. 항생제저항성 유전자가 genome 상에 integration 되어 있고 2번의 plasmid 가 같이 존재하는 균주
이때 각각 LB와 LCm(LB+chloramphenicol) liquid 배지에서 여러번 dilution 해서 키워봤으나 항생제 저항성유전자가 integration 된 균주는 growth가 느리기 때문에
LB dilution 시 1번의 균주에서 plasmid 가 빠진 wild type 균주가 분리되고
LCm dilution 시 1번균주가 분리되는 현상이 일어납니다
또한, phage origin 이기 때문에 single colony 가 단일 genotype 이라고 단정지을 수 없는 문제가 있습니다
LB 와 LCm 을 번갈아 가면서 키우면 효과가 있을가요?
아니면 다른 효과적인 방법이 있다면 알려주시면 감사하겠습니다
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