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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 western blot 실허 관련 질문 있습니다 !
알대하권진학예정(대학생)  | 2022.12.01 20:05

학부생인데 1차항체 2차항체 붙이는 과정이 잘 이해가 안가서 질문 드립니다 ㅠㅠ 

 

1차항체를 처리- washing - 2차항체 처리 하는 과정에서 중간 washing 과정 관련해 의문이 들었는데요.

2차항체가 1차항체를 확인하기 위해 붙이는 것으로 알고있는데 washing 과정을 거치게되면 1차항체가 제거될텐데 왜 washing을 하는건가요??

#웨스턴블롯
 
#weastern blot
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2022.12.01   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- 1st Ab는 membrane의 Ag에 붙어 있기 때문에 제거되지 않고 Ag에 붙지 않은 1st Ab를 제거하기 위하여 washing합니다. 

앞다리필1  |  2022.12.02   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

단백질과 1차 항체의 사랑(결합)은 워싱버퍼 따위로 끊어 낼수 없습니다 ㅋ

올챙이Steady  |  2022.12.06   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

primary Ab를 처리하면 target protein을 Ag으로 인식하여 결합할 것입니다. 

이 과정에서 모든 primary Ab가 Ag에 붙는다고 보장할수가없습니다. 따라서 붙지 못한 Ab를 씻어내주는 과정이 Washing과정이고 불필요한 Ab를 씻어내줘야 secondary Ab를 붙일때 깔끔하게 붙고 최종적인 결과에도 깨끗이 나오게 하는 것입니다.

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