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질문 섹션 할 때에 조직 갈라짐
앞다리별헤는밥(대학원생)  | 2022.12.01 11:01

파라핀 블록을 만들고 섹션을 할 때에 파라핀 영역은 괜찮은데 조직 영역이 완전 갈기갈기 찢어져서 섹션이 됩니다.. 갈라지듯..?

일단 prep하고 나면 4%PFA에 24시간 정도 4도씨에 보관한 뒤 30분 정도 흐르는 물에서 wash하고 Tissue processor 기계에 넣어 조직 처리 후 파라핀블록 만듭니다.

organ은 skeletal muscle입니다.. 어떤게 문제인지 모르겠네요ㅠㅠ

동기에게 듣기론 4%PFA하기 전에 Sucrose에 넣는 것도 좋다곤 하던데요..

#section
 
#paraffin block
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
지나가던 회사원  |  2022.12.02    

skeletal muscle을 해본적은 없지만 비슷한 문제를 식물에서 겪어봤을때는 조직이 너무 연하거나 조건이 맞지 않으면 비슷한 경험을 했습니다. 

다른 논문 protocol을 참고하셔야할것 같네요

wje9211@naver.com  |  2022.12.05    

조직에 수분이 부족하면 그럴수 있습니다. 

파라핀블럭에서 조직이 드러나면, 얼음물에 블럭을 잠깐담궈서 불려준다음 깍으면 잘잘립니다. 

 

알mindfields  |  2022.12.06   

근육은 paraffin보다 snap frozen으로 자르는 것이 제일 좋았던 것 같습니다. 가능하시다면 snap frozen으로 진행해보시는 것을 추천드립니다.

 

paraffin section할 때 조직이 갈라지는 것은 조직처리 과정에서 시약이 제대로 조직안으로 침투되지 않아 그럴 수 있으니 확인하면 좋을 것 같습니다. 어느 부위의 skeletal muscle인지는 모르겠지만 확인하고자 하는 부위만 trimming하여 진행해보면 좋을 것 같습니다.

kby930@naver.com  |  2022.12.06    

Skeletal muscle 같은 경우에는 paraffin embeding 시 크랙이 생기기 때문에 보통 Cryosection으로 진행합니다.

https://basicmedicalkey.com/muscle-biopsy-in-neuromuscular-diseases-3/

 

Cryosection prep 시에도 느리게 얼리면 조직 내 수분이 팽창하여 조직을 다 찢어놓기 때문에 수분이 결정구조를 형성하지 못하도록 LN2로 빠르게 얼려야 합니다.

https://basicmedicalkey.com/muscle-biopsy-in-neuromuscular-diseases-3/

 

저도 엄청 고생을 했던지라.. 참고했던 문헌 올리고 갑니다.

 
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