RAW 264.7 cell에 단백질로 p-p65등을 western blot으로 보려고 합니다.
근데 화면 지지직 거리는 그런 화면같이 나오거나 crop 밴드 형태만 나오고 band가 안나옵니다. 뭐가 문제인지 모르겠어요. 캐미닥을 쓰고 있고 blocking solution은 Ez blockchmi 쓰고 있고 transfer도 blocking과 같은 브랜드 제품 쓰고 있습니다
고수님들 도와주세요ㅠ 오늘안으로 알아야 되서요ㅠㅠ 급합니다
marker도 안 보이는 걸 보면
transfer가 잘못 되었거나
케미닥 작동이 제대로 안 되고 있거나
두 가지를 먼저 확인해봐야 하겠네요
마커는 membrane에 보였고, band는 폰슈로 확인했습니다
결국, 단백질 양이 문제이거나, 안티바디가 안맞을 경우입니다 .
이런경우 파지티비 마커를 같이 실험을 진행하면, 문제를 알 수 있습니다.
antibody를 바꿔서 써볼게요 저희실험실에는 positive가 없어서요