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실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
동물세포DNA를 e.coli로 cloning하기
레벨3 SHY (대학원생)
말그대로 동물세포의 DNA를 E.coli로 transformation? transcription? 싶은데 intron을 어떻게 제거해야하나요?
RNA 중합효소와 역전사 효소를 동시에 넣고 반응시킨 후 gel puri하면 exon만 있는 DNA를 얻을 수 있을까요?
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답변 1
동물세포에서 mRNA를 정제하세요.
mRNA는 intron이 제거되고 exon만 연결된 RNA입니다.
oligo-dT나 유전자의 3'-specific oligo와 RT를 처리해서 cDNA를 만듭니다.
5'-specific oligo와 3'-specific oligo를 넣어서 PCR하면 됩니다.
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