실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
연구자 본인의 체액으로 실험 ,,, ?
레벨1 사자돼지 (대학원생)
안녕하세요
엑소좀 관련 연구를 준비하고 있는 석사 2학기생 입니다!!
슬슬 졸업 논문이 될 동물실험을 계획하고 있습니다.
이제 본 실험을 들어가면 웨스턴을 통해 exosome marker 확인도 해야하고, 또한 특정 조직 유래 exosome 마커를 활용한 2 step Exosome isolation 을 진행중인 만큼 해당 마커도 확인하기 위해 웨스턴을 필수적으로 연마해야 합니다.
하지만 현재 웨스턴 블롯이 아주 미숙한 상태라 많은 연습이 필요합니다. 2step exosome isolation 프로토콜 확인 및 웨스턴 연습을 위해 cell culture를 통해서 exosome을 취득하고 있는데, 문득 너무 비효율적이라는 생각이 들었습니다.
특히 오늘 ,, protein 정량을 위해 BCA assay를 진행했는데,,, 어디선가 날려먹었는지 cell culture 부터, 처음부터 다시 해야할 수도 있다는 생각에 이런 생각이 더욱 강렬하게 들더라구요,,,,
cell culture medium을 통해 exosome을 취득하려면 그 양 자체가 적어서 많은 양을 키웁니다.(150mm x10, 이렇게 나온 exosome을 다 합쳐야 웨스턴 할만한 양이 나오더라구요 ,,) 또한 조직별로 구분하는 만큼, 조직의 수 만큼 더 많아지구요,,, 2~3조직으로 하면 150mm 30판,, 연구실이 작고 다들 바빠서 혼자 합니다 물론 혼자 하는게 당연한거긴 한데,,
그래서 그냥 제 소변을 이용하면 어떨까라는 생각이 문득 들었습니다.. exosome isolation 키트, 안티바디 모두 호환이 되서 당장 실현은 가능합니다만
너무 미친사람이 되어가는게 아닌가 우려가 되어서,, 혹시 저같이 본인의 혈액, 소변 등을 이용해서 파일럿 혹은 연습 실험하는 사람이 있는지 궁금해서 글 올리게 되었습니다...
아 물론 제 몸에 케미컬 인젝션은 안합니다,,,
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