실험 Q&A Cell Biology > Differentiation/Proliferation
MC3T3-E1 cell에서 처음보는 양상이 나타나며 세포가 자꾸 죽는데 같은 현상 겪어보신분 계실까요?ㅜㅜ
레벨1 juls (대학원생)
현재 MC3T3-E1 세포를 이용하여 ALP activity와 ARS Staining을 위해 분화를 시키고 있는데 분화과정 중 (분화물질 처리 기준) 약 3~4일차부터 다음과 같은 현상이 나타나서 애를 먹고 있습니다.
셀 테두리 부분이 well에서 육안으로 관찰시 곰팡이가 피는 것처럼 하얗게 테두리가 생기고 (위 사진) 현미경으로 관찰시 다음과 같이 세포가 죽는 양상이 나타납니다 (아래 사진)
분화 조건은 24well 에 7*10^4/well로 seeding 후 2일 뒤 분화물질 & 샘플 처리를 들어가고 3일에 한번씩 교체를 해줍니다.
배양배지 & 분화배지 & 분화물질 전부 교체 및 세포 교체를 진행해보았는데도 동일한 현상이 발생하고
분화물질을 치지 않은 control well에서도 비슷한 현상(세포가 죽는 현상)이 나타납니다.
이전에는 잘되었었다가 갑자기 이런 현상이 발생하여 어려움을 겪고 있습니다 ㅠㅠ
혹시 동일하거나 비슷한 현상을 겪어보셨던 분들께 조언을 구하고 싶습니다ㅠㅠ
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