실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
extracted mRNA로부터 만들어진 cDNA를 증폭할 때, 왜 primer를 forward reverse 두 개를 쓰나요?
레벨1 엉덩이튼튼튼 (대학생)
안녕하세요.
Extracted mRNA로부터 만들어진 cDNA를 증폭할 때, 왜 primer를 forward와 reverse.. 이렇게 두 개를 쓰나요?
mRNA는 genomic DNA strand 중 single strand로부터 유래하기 때문에, 당연히 mRNA도 single strand로 존재하고, 그에 따라 당연히 해당 mRNA로부터 유래한 cDNA 또한 single strand로 존재합니다. 따라서 이 때, primer는 forward만 사용하면 될 것 같은데.. 왜 reverse primer까지 PCR 할 때 추가해야합니까? 어차피 추출한 mRNA에 대한 상보적인 sequence를 가진 strand가 없기 때문에 reverse primer는 넣어줘도 작용하지 않을 것 같은데..
고수님들 고견 부탁드립니다.
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