단백질 정제후 buffer change 후 0.2um Filter 로 처리하면
타겟 단백질들이 다사라져요 ㅠㅠ
타겟 단백질의 mw 은 10kda 정도 되는데........
이런적은 첨이에요 ㅠㅠ SDS-PAGE 를 걸어보면 다른건 다나오는데
필터 처리후 는 아무것도 보이지 않네요 ㅠㅠ
버퍼도 계속 제가 만들어서 사용하는데 ㅠㅠ
이유를 알수가 없네요 ㅠㅠ
갑자기 잘나오던 단백질이 안나오니 답답하네요 ㅜㅜ
- 단백질이 soluble하고 buffer change 후 침전은 없었나요?
일단 단백질 어그리게이션이 생긴 것일 수 있으니
원심분리기를 통해서 펠렛이 생기는 건 아닌지 확인해보시고
그런게 아니라면
필터의 제질과 단백질의 특성이 둘다 hydrophobic할 경우 필터에 단백질이 끼
는 경우가 있을 수 있습니다.
다른 제질의 필터를 사용해보실 것을 권장드립니다.
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