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질문 FACS Blocking 좀 알려주세요ㅠㅠ
올챙이sjsj3636(대학원생)  | 2022.10.13 16:31

안녕하세요! FACS를 처음 공부해보는 석사생입니다!ㅠㅠ

저는 HL-60(Human) cell을 이용하여 CD11b를 FACS를 이용하여 측정하려하는데요!

저희 연구실에서는 mouse sample을 2.4G를 이용하여 blocking을 해주었는데 찾아보니까 mouse fc receptor blocking용으로만 사용하는거 같아서요ㅠㅠ

human cell sample에서는 어떻게 blocking을 진행하나요ㅠㅠ,, 찾아보니 BSA를 이용하여 blocking해준다는데 이게 맞나요?,, 다 말이 달라서요,, 아니면 2.4G를 human sample에 사용해도 되는건가요?

논문 찾아보면 따로 blocking 했다는게 따로 명시가 안되어 있어서요,,

일단 저는 pellet 모아서 FACS buffer(0.5% BSA in PBS) 90ul+Ab 10ul을 넣은 후 4도에서 30분 둔 후, FACS buffer로 3회 wash를 진행하고 FACS를 찍어볼까 합니다,,

Human cell pellet sample에서 blocking을 보통 어떻게 하나요?ㅠㅠ

위에 적은 protocol대로만 진행해도 괜찮을까요????

도와주세요,,,,,,,,,,,,,,,,

#FACS
 
#blocking
 
#CD11b
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리CD4+T  |  2022.10.15   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

Human용 Fc receptor blocking 항체도 있습니다.  사용하시려는 2.4G가 어디에 사용이 가능한것인지도 확인 하셔야겠지요.

처음 해보는 실험이라면 논문을 참고하실수 있겠지만, 가장 좋은 방법은 실험자가 직접 이것저것 시도해보시는 것입니다. 민감한 타겟이라면 블락킹에 많은 영향을 받을 수 있지만 그렇지 않은 타겟이라면 그렇게 크게 대세가 뒤바뀌지는 않습니다. 

화이팅 하세요

 

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