실험 Q&A Cell Biology > etc.
LPS 추출 과정 중 질문이 있습니다.
레벨2 사람살려 (대학원생)
안녕하세요. 저번에 비슷한 질문을 드렸고, 좋은 답변을 얻었지만 실험을 계속 진행하던 중 궁금한 점이 있어 한번 더 질문 드리고자 합니다.
이번에 그람음성균에서 phenol-water extraction protocol을 이용하여 LPS를 추출하려고 하는데, 혹시 cell 수가 많으면 bacteria를 100도씨에서 끓이는 과정 전의 3DW와 phenol의 양, 반응 시간을 늘려서 진행해도 괜찮을까요?
또한 LPS 추출하실 때 DW를 넣고 끓이는 과정을 두 번 반복하여 진행하시는 분이 계시는지도 여쭙고 싶습니다!
마지막으로 phenol을 넣고 centrifuge하여 상등액을 추출하는 과정에서 따는 층이 제일 윗 층 (중간 층이 닿지 않는 제일 윗 층)이 맞는지도 여쭙고 싶습니다..
실험이 자꾸 실패하는데 원인을 몰라 질문드립니다..
답변 주시면 정말 감사하겠습니다!
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