[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
에이비클로널
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
Miami Winter Symposium 2023 – Molecular Neuroscience: Focus on Sensory Disorders 학회 참관기
전체보기 안전점검 LABox
 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
조회 2724  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 western 시 sample cooking
개구리새슬(과기인)  | 2022.10.06 12:42

western blot 시 sampling 하고 -20oC에 보관해 놓았다가

running 할 때 다시 끓여서 사용하고 있는데,

단백질이 할 때마다 조금씩 달라집니다.

혹시 쓸때마다 cooking 하는 것이 원인이 될 수 있을까요?

#western
 
#sample
 
#cooking
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2022.10.06   

- 당연히 달라집니다.

 

- 소분해서 -80도 보관하든지, 정량 -> heating해서 보관하는 것이 좋습니다. 

개구리새슬  |  2022.10.06   

아니요 제 말 뜻은 

단백질 정량해서 sample buffer 넣어서 한 번 끓여 놓은 sample을

-20oC에 보관하다가 running 할 때마다

다시 끓여서 쓴다는 말씀입니다.

그러니까 running을 세번째 하게 되면 total 5분씩 3번을 끓이는 셈이죠

결과를 보면 어떤 단백질은 괜찮은데

또 어떤 단백질은 달라지는 것 같아 문의 드린 것입니다.

대왕개구리SPEED  |  2022.10.06   

- western blot 시 sampling 하고 -20oC에 보관해 놓았다가

: 이 단계가 heating했다는 뜻인가요?

 

- SDS-PAGE sample의 heating은 1회를 기준으로 실험합니다.

 

- 여러번 heating하는 것은 protein stability에 좋지 않을 뿐더러 1회이상의

heating은 불필요한 heating입니다.

 

- 1회 heating으로 SDS, 환원제 반응은 모두 끝납니다.

개구리새슬  |  2022.10.06   

- western blot 시 sampling 하고 -20oC에 보관해 놓았다가

: 이 단계가 heating했다는 뜻인가요?

--> 네 맞습니다.

 

불필요한 것이랑 안되는 것은 다른 것 같아서요

혹시 이런 단계를 반복하면 단백질에 변성이 올 수도 있을까요?

개구리차몬드  |  2022.10.06   
이미 한 번의 heating으로 필요한 변성은 끝났는데 굳이 변성을 한 번 더 하는 이유가 있나요?
개구리새슬  |  2022.10.10   

얼렷다 녹이면 homogeneous하지 않을 것 같아서 

다시 cooking하고 있습니다

저희 랩에서는

답변하기
할인행사/신제품신기술 광고 검색광고
프레스티지바이오로직스 프레스티지바이오로직스
항체의약품 전문 CDMO, EU-GMP, GDP 시설 내 셀라인·공정개발·임상배치·PPQ·스케일업·원료분석·..
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
Spatial Transctiptome 분석 Tumor Microenvironment(TME) 연구의 새로운..
이츠바이오 이츠바이오
[abm] PCR Products 1+1 및 20% 할인 행사!! (4.28까지)
바이오닉스 바이오닉스
[TECAN No.1 한국공식대리점] TECAN 봄맞이 대행사! 견적 및 Demo 신청시 상품권 지급 (4.9까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
최대 800개 유전자 발현량을 동시에 확인할 수 있는 nanoString nCounter SPRINT SAL.. (12.31까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN 한국공인대리점] TECAN Microplate reader/ IMPLEN Nanophotomet.. (4.11까지)
최근등록   더보기 >
SDS-PAGE marker band 위치 문제   03.26
Telomere length 의 통계적 처리   03.25
pLentivirus 을 이용한 target gene insertion 질문드립니다   03.25
외국에서 식물 잎 운반 방법 궁금합니다.   03.25
cell selection할 때, Hygromycin B 항생제가 잘 안드는데 보관 조건을...   03.25
전기영동에서 band가 어떤걸 의미하나요?   03.25
Trypton,pepton   03.24
메탄올 용매 용해 독성   03.24
cloning 실험하는데 dna 몇 최소 ng 있어야 사용가능한가요?   03.24
blue-white screening 실험에서 전기영동을 하는 이유가 뭔가요?   03.24
최근답변자 우수답변자
대왕개구리강시

개구리실험조아

대왕개구리SPEED

알enen

알나는야학부생

알Choip

알친절하게살자

개구리새슬

꽃개구리개그

개구리propadrum

개구리Daegu*

개구리Marine

개구리미맹

개구리ExDown's

꽃개구리juno

꽃개구리스카이

실험관련연재
세오 연재중실전 실험 프로토콜 101
세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
엘앤씨바이오 광고