실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Sequencing
돌연변이 유도 실험관련 조언 부탁드립니다
레벨1 IGF (대학원생)
Zebrafish( Danio rerio)에 있어서 돌연변이 유도 화학물질이라고 생각되는 물질 "X"를 zebrafish에 처리해서 돌연변이를 유도시킬 계획입니다. 실험계획을 짜고있는데 돌연변이 실험 관련해서 조언을 구할 수 있는 곳이 없어 부득이하게 BRIC 고수분들께 질문올립니다.
실험계획
1. gDNA extraction by finclip (물질 "X" 처리 전) =a
2. 물질 "X" 처리, (Control group은 미처리)
3. gDNA extraction by finclip (물질 "X" 처리 후) =b
4. a, b + 선별된 target gene 1,2,3,4,5 primer + SYBR Green mix realtimePCR->melting curve 확인
5. a, b 에서 같은 target gene의 melting curve가 달라졌다면 돌연변이 유도가 일어났다고 판단 (Control group이 달라졌을 경우 troubleshooting 후 재실험)
과정중에 어떤 부분이 미흡한지 지적 부탁드립니다. 추가적으로 더 나은 실험법이 있다면 공유부탁드립니다!
Bio마켓 프리미엄