실험 Q&A Cell Biology > Cell Culture
PDL, PLL coating 차이와 형태 질문드립니다.
레벨2 neuronal plasticity (대학원생)
안녕하세요, 저는 HEK293T를 이용하여 confocal sample을 준비중에 있습니다.
저희 실험실에서는 HEK293T을 주로 이용해왔으나, 여태까지 coating되지 않은 plate만을 사용해 왔기 때문에 Poly D lysine이나 Poly L lysine에 관해서는 잘 알지 못합니다.
그런데 찾아보니, 일반적인 well plate에서도 transfection시에 coating된 well을 사용하시는 경우도 있더군요. 저희는 그냥 최대한 조심히 control하여 실험 step마다 cell이 최대한 떨어지지 않게 하는 편입니다. 물론 culture시간도 최대 4일 이내로 짧아서, coating이 필요 없는 것 일수도 있습니다.
하지만 confocal sample을 준비하는데에는 coating이 필요할 것 같아서 알아보고 있습니다. 처음 cell을
Hela cell을 이용하여서는 sample준비를 여러번 해 보았지만, 해당 cell은 부착력이 매우 강해서 coating없이도, 거의 떨어지지 않더군요.. 하지만 HEK은 워낙에 잘 떨어지는 cell이라 반드시 coating이 필요할 것 같습니다.
여기서 제가 드리고 싶은 질문은,
1. PDL vs PLL
제가 찾아본 결과 PDL은 다른 enzyme에 의해 분해되지 않으며, PLL보다 덜 toxic하다고 나와있었습니다. 그러면 PDL이 무조건 더 좋은거 아닌가요..? 가격차이도 거의 없는 것 같았습니다. 근데 대부분의 lab에서는 PLL을 사용하는 것 같더라고요. 혹시 이 둘에 큰 차이가 있을까요? PDL coating glass 위에서는 cell이 잘 안자란다거나..
2. Powder vs Solution
PDL, PLL 모두 powder 형태와 solution 형태로 팔고 있었습니다. powder형태는 적당히 DDW에 녹이고 filteration 해서 사용하는 것 같고, solution은 바로 dilute해서 사용하면 되는 것 같았습니다. 혹시 둘 중 뭘 사는것이 좋을까요? 저희 랩에서는 confocal로 imaging을 하는 것이 주 분야는 아니지만, 가격차이가 크게 난다면 Powder형태로 구매하는 것이 좋을것 같다는 생각은 하고 있습니다.
3. 재활용..?
또 많은 분들께서 PDL, PLL은 재활용이 가능하다고 하시던데.. 이게 무슨 뜻인지 잘 모르겠습니다. coverglass를 담갔던 PDL, PLL을 syringe 등으로 suction해서 다시 쓴다는 의미인가요..? 그러면 contam 걱정은 없는 건지.. 궁금합니다.
깨알 팁이라도 좋으니 조금이라도 도와주시면 정말 감사드리겠습니다.
감사드립니다!
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