실험 Q&A Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
HT22 cell에서 Glutamate 세포 사멸 유도 질문!
레벨1 두둘기 (대학원생)
안녕하세요. 이제 석사 2학기 되는 대학원생입니다.
작년부터 올해까지 HT22 세포에 Glutamate로 세포 독성을 유도하고 있는데 계속 잘 안풀려서 여기에 질문 드립니다.
상황을 간략하게 설명드리면, glutamate는 sigma Cat.no 46912 제품을 사용하고 있습니다.
HT22cell (LM001-05배지 사용)로 96-well, 60mm 모두 유도 해보았고, 여러 시도끝에 10mM이라는 농도도 잡았습니다.
(처리할때는 serum free에 녹여서 10배 높은 농도로 처리합니다. (ex) final : 10mM이면, Treat : 100mM))
하지만 늘 Glutamate를 새로 만들고, 만드는 방식도 Glutamate양과 분자량 비율대로 계산해서 녹이고, 필터하고, 처리하는 방식인데
어떤날은 세포를 50% 죽이고, 어떤날은 10%도 안죽이고.... 하....
실험실 선배님들과도 이야기를 해보았지만 도저히 이유를 모르겠어서 올려봅니다.
혹시 제가 못보는 부분이 있다면 가르침 부탁드립니다...
긴 글 읽어주셔서 감사합니다!!
질문 요약
1. Glutamate의 HT22cell 사멸유도에서 주의해야할 점이 있나요?
2. 늘 같은 방식으로 Glutamate를 만들고 처리해도 유도되는 cell death의 %가 다른걸까요..?
Bio마켓 프리미엄