- 큰 plasmid 기준이 뭔가요?

- 전기영동의 원리를 생각해보면 agarose gel의 농도를 높이면 괜찮을 것

같은데

: gel %를 내리면 됩니다.

colony plate 뒷 면에 점을 찍어서 번호를 새기고 

1차 거르는(?) 방법으로로 colony pcr을 해 보면 어떨까요? 

그래서 해당 insert 가 pcr 되는 것만 

enzyme cutting해서 확인해 보면 좋을 것 같은데, 

plasmid 단일 컷 하면 size보기가 좋지만;;; 
그래도 어짜피 효소를 쳐야하니깐 plasmid를 뽑아야 되잖아요? 

1차로 colony 살짝 찍어서 pcr로 screening 하는 게 좋겠어요. 

네, 분리해야 하는 플라스미드가 각각 6000, 6500bp 정도 됩니다. 많이 큰 편은 아니지만 저희 실험실 기계로는 분리가 어려워서 크다고 적었습니다. 플라스미드 프랩은 해놓은 상태인데, pcr을 돌리는 것은 시간이 너무 오래 걸리고 무엇보다 enzyme cut한 부위가 프라이머 결합부위라 프라이머 주문부터 기다려야 할 것 같아 다른 방법을 찾아보는 중이었습니다. 

- 그 정도 크기는 일반적인 크기이고 일반 전기영동조로도 충분히 분리됩니다.

- 제한효소로 잘라서 확인하면 됩니다.