실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
Ponceau staining하면 marker만 뜨고 band는 안 나옵니다. 조언 부탁드립니다ㅠㅠ
레벨3 아스널 (대학원생)
transfer 끝나고 nitrocellulose membrance에 Ponceau solution으로 염색하면 marker는 선명하게 나오는데 band는 깨끗하게 안 나옵니다.
카세트 삽입할 때 "검은판(음극)-스폰지-3M paper-gel-membrane-3M paper-스폰지-빨간판(양극)" 이렇게 올리고 꾹꾹 누르고 90V, 0.04A, 1 hour transfer 진행하는데요.
transfer는 딱 1번 성공했습니다.
transfer가 끝나고 나면, gel에 아무것도 안 남아있어야 하나요?
그리고 gel에 Ponceau 염색해서 단백질이 남아있는지 판별해도 된다는 글도 있던데요. 그렇다면 transfer 끝나고 gel에 Ponceau 염색 후, 단백질이 gel에 있으면 다시 카세트 샌드위치 만들어서 transfer 진행해도 되는 것인가요?
웨스턴블롯 초보자는 이렇게 속으로 웁니다ㅠㅠ
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