실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
electroporation 실험용 G+ competent cell Washing용액 질문입니다
레벨2 PORI (일반인)
electroporation을 하기위해서 G+ lactococcus lactis competent cell을
제조하고있는데요.
제가 찾은 프로토콜에서
'0.5M sucrose with 10% glycerol'로 washing하라고 나와있는데
각각 오토클레이브 돌리고 0.5M sucrose와 10% glycerol을 얼만큼
pelet에 넣어서 resuspend하는지 이해가 가지 않습니다ㅜ
(파일 첨부하였습니다)
그리고 G+프로토콜 찾아보면
- 0.5M sucrose만 사용해서 CC만드는 방법
-10% glycerol만 사용해서 CC만드는 방법
- 0.5M sucrose와 10% glycerol 같이 사용해서 CC만드는 방법
이렇게 크게 세가지 인것같은데, 그냥 방법이 3가지인것인지
아니면 Staphylococcus는 0.5M sucrose로 사용,
TSB로 키운 CELL은 10% glycerol만 사용
이런식으로 균주별, medium별로 분류되는것인지도 궁금합니다.