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BioLab 이은열 교수
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 전체 > Molecular Biology-DNA > Transformation
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질문 Miniprep 한 벡터 transformation이 안됩니다.
알창의적인사람(대학원생)  | 08.15 09:52
pDS132 계열 벡터를 S17-1 λ pir에 transformation하려 하는데.. 이 벡터에 cat이랑 nptI 유전자를 넣었습니다..
이 벡터를 DH5a λ pir 에 transformation 했을 때, colony가 잘 떴지만, S17에서는 하나도 뜨지 않았습니다.. (heat shock transformation 하였습니다)
C-cell 문제인가 싶어서 pRK415 벡터를 시험삼아 transformation 했는데 콜로니 잘 나왔구요..
1. Km 100, Cm 20 plate 를 사용중인데 혹시 S17이 두 항생제에 민감한지..
2. Heat shock이 잘 안되어서.. Electroporation을 하려 하는데 이 방법으로 콜로니 얻을 수 있는지 여쭤봅니다.

#S17-1 λ pir
 
#클로닝
 
#Transformation
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개구리Q.E.D.  |  08.17 06:34  
해당 재료를 사용하지 않아서 잘 모르지만
두가지 항생제를 병합해서 사용하는 경우,
KM이 생장 저하를 일으킬 수 있어서
KM이 포함될 경우, 전 50만 사용합니다.
참고만 하세요 ^^
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