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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
조회 369  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Bradford Protein 이후..
올챙이하윰(대학원생)  | 08.12 20:15

막 대학원을 시작하는 학생입니다..

1mg/ml BSA STOCK 을 표처럼 시약을 넣어서 표준곡선을 그린후

BSA (ug/ml) 0 2 4 6 8 10 12 14
D.W(ul) 800 798 796 794 792 790 788 786
Reagent(ul) 200 200 200 200 200 200 200 200
Total(mL) 1 1 1 1 1 1

1

1

sample은 넣어

sample  5ul
D.W(ul) 795ul
Reagent(ul) 200ul
Total(mL) 1

96well에 595nm로 흡광도를 측정하여

y = 0.0555x + 0.2786이 나왔는데 

sapmle x 값이 6.94가 나왔습니다. 

근데왜 6.94x2를 해서 13.88로해서 해야하는건지 이해가 안되서요..

  5x
sample buffer 
D.W   total
13.88 4 2.12   20ul

 

13.88로해서 왜 western loading 해야하나요..? 정말 답을 모르겠어요

#western blot
 
#Bradford Protein
 
#sample 값
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
 |  08.13 05:18   

sample x의 농도가 얼마이고

얼마의 양을 loading하고자 합니까

두 값을 안다면 이해가 될겁니다.

지금 질문에는 값이 안 나와서 왜인지 설명할 수 없습니다.

대왕개구리SPEED  |  08.13 09:29  

- lab에서 정해진 loading양이 얼마인가요?

올챙이하윰  |  08.13 16:28  
평균 O.D
(595nm)
X(5ul) ug/ul
0.66 6.94

 입니다 

대왕개구리SPEED  |  08.13 17:22  

- 질문을 다시 보니 assay가 잘못되었습니다.

 

- STD는 농도별로 만든 후 sample과 STD는 모두 동일한 양을 측정해야 합니다.

올챙이하윰  |  08.16 08:48  

잘모르겠어서 그런데요.. 예를 들면 어떻게 하면 될까요? 

 

std와 sample처리를

 

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