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Electro-transformation 자체가 large size 를 위해서 고안된 방법이기 때문에 선생님의 크기가 얼만지 모르지만 실험에 별 문제가 되진 않습니다.. 크기는 잘기억이 않나 말씀못드리지만 10kb이상도 가능합니다..
그리고 YAC vector는 안써봐서 모르겟습니다..저는 참고로 heat-shock 보다는 electro를 선호합니다...
Heat shock method로 100kb까지 넣어봤습니다.
그 이상은 어떨지 잘모르겠네요..
YAC 100kb이하라면 heat shock으로 넣으시면 됩니다.
전에 BAC library를 만들때 insert의 크기를 250-300kb 정도로 했었고 electroporation을 했습니다.
실제는 150-200kb 정도의 클론이 나오며 그 이상의 크기는 얻기가 힘들었습니다.
YAC을 yeast에 넣을때는 sphroplast법을 사용합니다.
아마도 electroporation이 yeast에 큰 DNA를 넣기에 적당하지 않아서 일것으로 봅니다.
YAC libraray를 대장균에 넣을때도 BAC의 방법을 준용하지만 대장균에는 circular clone만 들어갑니다.
하지만 YAC clone은 yeast에서는 linear form을 존재한다는것을 기억하세요.
YAC library를 대장균에 만들어서 그걸 다시 yeast로 넣는다는 생각은 좋지 않은 시도입니다.