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BioLab 장재봉 교수
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질문 tg마우스 만들기. B6/N 과 J가 섞여도 되나요
알암세포1(과기인)  | 2022.08.11 13:02

안녕하세요

ES cell targeting으로 tg mouse를 만드는 과정에서 질문이 있습니다.

gene manipulation한 ES cell line은 background가 B6/N인데, 교배하여 colony를 만들 적에 B6/J를 사용해도 되는지요?

이미 만들었다면, 나중에 용인이 될 수준인지요? 면역학 실험에 사용할 예정입니다 (N과 J는 102개 SNP 차이가 있고, phenotype에도 영향을 미칠 '수' 있다고 알고 있습니다만.. 컨센서스가 궁금하네요)

이걸 만회할라면, 몇 번 back crossing을 해야할까요. 이게 비효율적이라면 chimera를 다시 B6/N wt과 교배시켜야할까요?

추가로.. mouse coat color gene (agouti) 도 보통 backcrossing으로 다 없애고 시작하시는지, 아니면 이정도는 그냥 black mouse와 동일하다고 보고 사용하시는지도 궁금합니다.

브리딩 한 번도 안 해보다가 처음 도입하려니 모르는게 많습니다..

도움 부탁드립니다.

감사합니다!!

#chimera
 
#mouse breeding
 
#B6
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
올챙이텔루르  |  2022.08.11   

제가 다녀간 동물 실험을 진행하는 연구실들에서는 B6/ N, J 확실히 나눠서 breeding 하는 곳이 대부분 이였습니다.

 

N, J phenotype에서 차이가 난다고 잘 알려진 부분은 시각, 대사, 파킨슨 쪽이긴 해서 실험하시려는 면역 계통에는 영향이 없을 수도 있겠지만

실험이라고 하는 것이 혹시 모르는 것이니 mouse로 인한 변인은 최대한 제거하시는 방향으로 실험을 설계 하시는게 어떠실까요..

만약 backcrossing을 하신다고 하면 일반적으로 6세대정도 내린 뒤 사용하게 됩니다. (0.5^6 = 1.5625%)

이미 J와 hybrid가 되었으면 몇 세대정도 breeding이 된지 확인하신 후 N으로 backcrossing하셔서 최종적으로는 J 비율이 1.5625% 이하가 될 때 까지 내리시면 되겠네요.

 

https://www.jax.org/news-and-insights/jax-blog/2013/october/three-ways-a-b6j-mouse-differs-from-b6n-and-why-it-should-m

-수정

Jackson guide를 보니 backcrossing시 10세대 이상을 권장하긴 하네요.

올챙이암세포  |  2022.08.12   
아 너무 감사드립니다!
as까지..
10번 크로싱은 너무 비효율적으로 보이긴 하네요..
혹시 다른 랩 분들도 의견 있으시면 말씀 부탁드립니다
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