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웹진 Vol.24, No.10 (2022년 10월) 발간
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 전체 > Cell Biology > Viability
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질문 MTT assay protocol
알힝아(대학원생)  | 08.10 19:22

안녕하세요.

물질의 보호효과를 보기위해서 pretreat 개념으로 약물 처리 후 독성을 쳐서 cell viabilty를 확인하고자 mtt assay를 진행 중에 있습니다.

여러 프로토콜을 찾아보다가 저희 실험실에서 사용되어온 프로토콜이랑 달라 여쭤봅니다.

저는 cell seeding 24hr뒤 약물 처리 시간 지난다음 독성물질 24hr을 처리한 뒤 MTT 시약을 처리하는 데요.

MTT 시약 5mg/ml 을 pbs에 녹인 후 1/10 dilution(0.5mg/ml) 된 mtt 시약을 처리합니다.

대부분의 프로토콜에서는 미디어 제거 후 페놀레드가 없는 미디어 90ul+mtt시약(5mg/ml) 10ul 처리하던데

저희 방에서는 페놀레드가 없는 미디어 대신 pbs에 희석하여 처리하는데 괜찮은 걸까요?

cell culture medium에 희석해서 사용해야하나요?

정리하자면 저희방에서는 0.25g/50ml (10xmTT시약)이라 칭하고 1x로 희석하여서 바로 처리하는데 그 희석 용액이 pbs인데 맞는 건가 해서요. ㅠㅠ

cell culture medium을 사용해야한다면 MEM gibco 제품 사용하고있는데 혹시나 MEM phenol red 없는 제품 사용하시는 분 계시면 답변 부탁드리겠습니다.

#MTT ASSAY
 
#CELL VIABILITY
 
#PROLIFERATION
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
올챙이Completion  |  08.11 00:13  

phenol red 와 formazan의 파장값이 겹칩니다.

PBS에 희속해서 사용해도 됩니다.

 

 

알힝아  |  08.11 09:23  

답변 감사합니다. Completion 선생님.

말씀해주신 뜻은 MTT 시약 처리시 90ul phenol red가 없는 미디어 사용하는 것을 pbs로 사용해도 된다는 말씀이신거죠?

올챙이Completion  |  08.11 21:58  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

넵. 맞습니다^^

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