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 전체 > Molecular Biology-Protein > Extraction/Isolation
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질문 protein extraction
올챙이열두시삼십분(대학원생)  | 08.10 15:52

cell을 harvest 하고 western을 진행하기 위해 protein extraction을 기계로 결과값을 내는데요. protein 농도가 마이너스가 나오는 경우는 왜 그런건가요ㅜㅜ?

 

lysis buffer는 늘 같은 걸로 이용을 해왔는데 언제는 값이 잘 나오다가 언제는 마이너스 나오고 참 들쑥날쑥 한데 이 원인이 왜 인지 혹시 저같은 경험 해보신 분 계신가요 ㅜㅜㅜ?

cell lysis가 충분히 되지 않은 것 같은 경우도 생각해서 충분히 lysis 한 후 4도씨에서 rotation 하고 15000rpm, 15min centri 진행 하고 protein assay 용액 500ul에 protein 2ul 넣고 96 well에 200ul씩 2번 분주 하는데요 

 

마이너스 값이 나오는데 왜 그러는 건가요ㅜㅜㅜ

#western
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..  |  08.10 18:14   

어떤 기계로 어떻게 측정합니까

개구리세오  |  08.10 19:26  

스탠다드 (standard) 커브도 같이 해서 측정한 값인가요?

단백질 없이 라이시스 버퍼만 넣은 웰에서는 마이너스 값이 나오기도 하는데, 단백질이 추출이 되지 않은 건 아닐까요? 

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