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웹진 Vol.24, No.10 (2022년 10월) 발간
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 전체 > Molecular Biology-Protein > Pull-down Assays
조회 317  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 HPLC retention time 및 wavelength 관련 질문
알막5(과기인)  | 08.08 17:49

HPLC 관련 실험을 진행하고 있는 연구원 입니다.

관련 공부를 할려고 논문을 보다보니 식물 추출물 관련해서

두가지 다른 물질이 같은 retention time 을 가지고 다른 wavelength를 가집니다.

논문에서는 retention time과 wavelength를 기반으로 분류하였다고 되어 있는데

같은 부서의 연구원 분이 이 부분이 이상하다고 합니다. wavelength의 차이는 피크의 크기 차이만 생길 뿐이지 wavelength차이로는 다른 물질의 구분이 안되고 다른 물질의 구분은 retention time 만으로 한다고 합니다. 

그리고 연구원 분의 말씀이 맞다면 retention time이 같은데 어떻게 다른 물질로 판단하는 기준이 뭔지 궁금합니다. 

앞선 실험을 하셨던 여러 선배님들의 조언을 구합니다. 

#HPLC
 
#retention time
 
#wavelength
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리cslee  |  08.08 21:50  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

같은 retention time  에 두물질이 나온다는 의미는 분리가 안되었다는

의미이고, 파장 은 검출하고자하는 물질특성에 따라서 결정되어지는것입니다

예를들면,벤젠그룹은 254nm 에서 최대 흡수치가 나오므로 검출파장으로

설정하겠죠 물질흡수 파장을 모를경우에는 분광광도계로 찾아야 합니다

uv흡수가 일어나지않을경우나 이동상용매에 cutoff 걸릴경우 에는

elsd 검출기나 mass 을 이용하겠죠

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