실험 Q&A Laboratory Animals > In Vivo Imaging
Mouse Brain Paraffin section IF staining 섹션 두께
레벨1 뚠뚜딘 (대학원생)
안녕하세요!
현재 mouse brain에서 IF staining을 시도하고 있는데요..
먼저 brain은 PFA 고정 후 Parrafin으로 embedding 하였습니다.
선배랑 제가 따로 section을 진행하였고, sample 모두 받아서 제가 IF staining을 하였습니다.
선배는 5 um으로 section을 하였고 저는 8-10 um으로 section을 진행하였는데요. 일반적으로 parrafin section의 경우에는 5-8 um로 많이 한다고 하더라구요.
IF staining 결과 (IF staining 모두 한번에 진행) 선배 slide에서는 signal 이 굉장히 약하고 specific 하게 staining이 되지 않았습니다(거의 staining이 안 되었다고 봐도 무방).
조직 염색의 경우 section이 얇으면 얇을 수록 resolution이 좋고 깔끔하게 data가 나온다고 생각했는데 조직에 따라서는 두꺼울 수록 결과가 잘 나오는 경우도 있나요?
제가 8-10 um로 section을 다시 해서 IF staining하는 게 trouble shooting 이 될지 궁금합니다. 모든 step은 똑같은데, section한 사람만 다르니 ㅠㅠ..
그리고 paraffin section의 경우 8-10 um가 mouse brain 혹은 lung 보기 너무 두꺼운지도 의견 부탁드립니다 ㅎㅎ
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