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질문 cell line 만들 때 transfection, infection 차이
알1461hj(대학원생)  | 08.05 14:33

안녕하세요,

특정 gene을 과 발현 시키는 stable cell line 제작 중입니다.

저는 보통 viral vector를 이용해 virus를 만들어 infection 시켜주는 방식으로 실험을 진행하는데요,

교수님께서 항상 왜 그냥 transfection해서 integration 된 cell을 골라내지 않냐고 말씀하셔서요.

지나가는 소리로 선배들에게 transfection을 하면 infection보다 효율이 안좋다 란 얘긴 들었고,

transfection reagent는 핵막을 뚫지 못해서 division 되는 cell에만 들어가고 virus는 (lenti 사용) 핵막을 뚫는다, 정도만 알고 있는데 정확한 효율 차이 등을 아시는 분이 있으신가요?

답변 부탁드립니다 :-)

#stable cell line
 
#transfection
 
#infection
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pass  |  08.05 16:28   

trasfection reagent 효율이 많이 높아져서 stable cell line을 못 만들 정도는 아닙니다.

알science_  |  08.05 16:30  

답변 감사드립니다.

그럼 이전까지 virus를 사용하던 이유는 단순히 transfection이 극복하지 못한 효율 때문이었던걸까요?

개구리범수리  |  08.05 23:30  

아무래도 transfection같은 경우는 transient expression이 주된 목적이고, infection (transduction)같은 경우는 integration된 이후 좀 더 길게 발현이 되는것을 위해 사용 하죠.

Transfection같은 경우도 integration이 되는 경우가 있기는 한가요? integration 된 이후에 selection하는것은 viral vector로 넣어 주고 나서 가능 한거로 알고 있기는 한데...

처리 후 효율로만 본다면 제 경험상으로는 Lipofectamine을 이용한 trasfection이 가장 좋았고, 그다음이 Lenti 그다음이 Retro정도였어요, GFP기준으로.

어느정도의 기간동안 발현 시키는 것이 목적인지에 따라 골라 사용 하시면 될거 같아요. promoter쪽도 확인 해보시구요.

알science_  |  08.10 14:24  

범수리님, 답변 감사합니다.

저도 transfection 후 integration 적은 효율로 된다고 듣기만 했지 제대로 찾아본 적은 없는데요,

transfection은 integration이 안되고, virus를 이용하면 된다면,

어떤 원리의 차이 때문에 그런지 설명을 들을 수 있을까요?

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