실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
Westernblot band 안뜸과 non specific..
레벨2 써니22 (대학생)
안녕하세요. Westernblot 은 많이 해뵜다고 자신하던 연구자인데... 또 이렇게 벽에 부딫히네요 ㅠㅠ Tubulin 은 너무 선명하게 잘 뜨구요. Ponseau S 시 확인했을때 transfer 나 running 도 문제없다고 생각합니다. 그런데 target 항체에서 band 가 너무 지저분하게 잡히네요.... 5% BSA blocking 1hr RT 진행했고, Ab 도 같은 solution으로 진행했습니다. 2차는 3% BSA 로 1:3000 진행했는데... 2차가 너무 쎗을까요? 다른 연구원이 skimmilk 로 굉장히 데이터가 잘 나왔다고 해서 skim 을 썻는데 오히려 더 지저분 하네요 ㅠㅠ 더 바꿔볼 컨디션이 있을까요? 2차를 약하게 붙히면 깨끗해 질지.... 도와주세요 고수님들 ....😭 그냥 안티바디가 거지같은걸까요....?
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