실험 Q&A > Buffer/Reagent
0.45um syringe filter를 0.2um syringe filter로 대체해서 buffer를 멸균해도 괜찮을까요?
레벨1 dndb1303 (대학생)
안녕하세요. 실험실에서 일하는 학부생 연구원입니다. 논문을 보고 electroporation에 필요한 버퍼를 만들어서 멸균하려고 하는데요. autoclaving보다 filtration을 권장하는 버퍼가 있어서 고민입니다. 논문에서는 0.45um syringe filter로 filtration을 하라고 하는데, 저희 랩실에는 0.2um syringe filter밖에 없습니다. syringe filter를 하는 이유가 bacteria를 없애기 위한 거라면 0.2um가 더 좋긴 하겠지만, 혹시 0.2um의 filter를 사용했을 때 buffer의 화학조성이 바뀌지는 않는지 궁금합니다. 다음은 제가 0.45um syringe filter 대신 0.2um syringe filter로 filtration 하려는 buffer들입니다. (참고로 ultrasonication 과정은 생략하고 magnetic stirrer로 대체할 것 같습니다.) 1. Glycine (w/v) 3.75g (25ml) Dissolve it in a small amount of DDW by ultrasonication & agitation. → add DDW to 25ml 2. MgCl2 (95.211 g/mol) 38mg and KH2PO4 (136.086 g/mol) 136mg (20ml) dissolved in a small amount of DDW → add DDW to 20ml 구글에 찾아보니 Glycine은 입자크기가 거의 나노미터 단위라 상관없을 것 같은데, MgCl2는 또 500um이라고 하더라고요(이건 물에 안 녹았을 때 이야기 같은데) magnetic stirrer를 오래 돌려서 물에 다 녹이면 화학물질들 사이즈가 딱히 상관이 없을까요?
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