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질문 ALDH 활성 측정
알오늘뭐하지(일반인)  | 08.02 22:29
첨부파일 파일첨부: NADH 활성측정법2.pdf (286 KB)

ALDH 활성을 측정할려는 고등학생입니다. 아세트 알데히드가 아세트산으로 가는 과정에서 NAD+가 NADH로 전환되는 것을 흡광도로 측정을 하려고 합니다. 

관련 문서를 찾아보니 Blandino의 방법으로

증류수 2.1 ml

1.0 M tris-HCl buffer (pH 8.0) 0.3 ml

20 mM NAD + 0.1 ml

1.0 M acetaldehyde 0.1 ml

3.0 M KCl 0.1 ml

0.33 M 2-mercaptoethanol 0.1 ml

과 효소원은 동결건조된 S9 rat liver homogenate (MOLTOX Co., USA)를 0.1% bovine serum albumin 용액 8 ml에 녹여 0.45 ㎛ syringe filter로 여과한 후 사용하였다. 라고 하는데 효소원으로 동일한 것을 구하기 어려워 소 생간을 준비했습니다. 소 생간으로 실험이 되는지, 생간에 어떤 처리가 필요한지 조언 부탁드립니다.

#ALDH 활성
 
#ALDH
 
#소 생간
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  08.02 23:37  
재료가 신선하면 가능할겁니다

Homogenization 후 12krpm, 20분 원심분리 후 상등액을 사용하면됩니다.
알오늘뭐하지  |  08.03 23:26  

Homogenization을 찾아보니 균질화라고 나오는데 생간에 균질화를 한다는 것이 어떤 도움을 주는 것인가요? 

추가로 학교에 Homogenizer가 없어서 혹시 대체방안으로 막자사발로 가는 것은 어떻게 생각하시나요..?

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