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배지를 어떻게 만드는지 알아야 뭐라도 말을 얹을 수 있겠습니다.
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레벨1
실험실애기
(일반인)
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22.08.01 12:14
우선 1L 플라스크에 400ml 계량한 증류수를 넣고 배지 따로 디렉션 따라서 계량하여 플라스크에 비웁니다.
플라스크 입구나 벽면에 붙은 배지 가루들은 나머지 증류수 100ml를 비워 쓸어내린 후에 마그네틱바를 넣어 잘 섞고 나면 호일로 입구를 막아 121도 15분 오토클레이브에 돌립니다.
이후 페트리디시에 비울 때도 클린벤치 안에서 개봉하여 약 20ml 정도 양만큼 비워서 다 만들고 나면 10개씩 쌓아두어 굳혀요.
제가 배지 만든 지가 한참 예전이라 기억을 좀 더듬자면...
보통 오토클레이브 돌리고 나서 꺼낸 뒤에도 아가가 안 녹고 뭉쳐있는 경우가 있는데
혹시 오토클레이브 꺼내서 다시 플라스크 안에 있는 마그네틱 바랑 벤치 같은 데 놓인
스티어러 써서 한번 더 섞어주시나요? (아니면 내열장갑 끼고 돌려서 섞거나)
- agar는 배지 성분이 녹을 때 실온에서 녹지 않습니다.
- autoclave를 한 후에 녹은 agar가 용기 바닥에 있기 때문에 배지를 만들기
전에 충분히 agar를 혼합하지 않으면 농도 구배가 생겨 배지가 정상적으로
만들어 지지 않습니다.
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레벨5
ʕ•ﻌ•ʔ뀨
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22.08.01 13:45
배지를 굳힐때는 뚜껑을 살짝 열어놓은 상태에 굳히고,
배지가 어느정도 굳게된 후에는 뒤집어서 보관하셔야합니다.
(수중기로 인해 배지에 물이 고이거나 떨어지면 흐물해지거나 쭈글해지거나..등등...)
기존에 하던방식으로 그대로 진행하시고 배지를 만들었다면,
덜 섞여서 흐물해지는경우는 드물기때문에,,,
아마 위에 이유가 아닐까 생각해봅니다..?
하지만 그날 진행한 모든 배지가 다 그렇게 된다면 윗분들 말씀이실 가능성도 높지여..