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아무래도 TBST에 담겨있다보니 항체는 느리지만 그래도 떨어져 나가고 있을꺼에요(tween20때문에)
그래서 옅게 나올꺼구요 그 membrane그대로 확인해서 좋게 찍으려면 1차부터 처리하는걸 추천드리구요
경향만 보겠다!라면 좀오래찍거나 쎈 ECL처리해서 확인하시면 될듯해요
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레벨3
열두시삼십분
(대학원생)
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22.07.28 15:25
그럼 1차부터 처리 하려면 stripping 해서 1차 처리하는 거지요?
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레벨4
experiment
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22.07.28 15:45
당연히 TBS-T에 담궈둔채 하루지나면 활성도 떨어지고 detection이 잘 되지 않죠!
혹 detection하기전에 ECL 용액에 반응시켜서 보는 경우, 다음날 또 그 membrane으로 결과를 볼거라면 TBS-T로 워싱하신 뒤 1차 antibody부터 다시 붙여서 봐야 처음봤을때랑 유사한 결과 얻으실 수 있습니다.
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레벨4
experiment
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22.07.28 15:46
아, stripping buffer있으시다면 TBS-T용액으로 washing 하지 않고 그 buffer 사용하시면 될 듯 합니다:)
그럼 1차부터 처리 하려면 stripping 해서 1차 처리하는 거지요?
- 어차피 같은 target보려는거면 굳이 stripping 안해도 괜찮습니다
완전 처음부터 제대로 해서 확인하고 싶다면 stripping해야겠지요
이건 질문자님의 선택인거 같아요
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레벨3
열두시삼십분
(대학원생)
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22.07.28 16:21
모두들 감사합니다! 저는 뭐가 잘못 돼서 안 보이는 줄 알고 식겁 했네요 ㅜㅜ 좀 더 확실하게 하려고 stripping 하고 TBST로 washing 후 1차부터 다시 해보겠습니다! 조언 감사드립니다!