실험 Q&A Cell Biology > etc.
Caspase-1 Glo (promega) 실험에 대해 여쭤봅니다.
레벨3 도도형 (대학원생)
Caspase-1의 활성을 보기 위해 Promega에서 glo kit를 구입하여
조건 set up중에 있습니다.
사용하는 cell은 Human lung epithelial cell인 H292입니다.
white 96-well plate에 5*10^4으로 cell을 100 ul씩 seeding을 하고
caspase-1 활성을 위해 P.aeruginosa (MOI 100)를 이용하여
infection시켰습니다.
이후 Luminometer로 detection하면 +/-의 수준이 크게 차이가 나지 않아 원인을 생각해보고 있는데 기본적인 basal level이 높아 inducing이 되어도 차이가 나지 않는 것인가 생각이 됩니다. ( + : 140,000, - : 120,000 )
다른 paper들을 참고했을 때 caspase3/7를 측정할 때 seeding 농도를 낮게 깔아 그것대로 cell seeding 농도를 낮추고자 하는데 혹시 제가 생각해볼만한 부분이 있는지 여쭤보고 싶습니다.
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