실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
PCR 시 template concentration 관련..
레벨3 RBR (대학원생)
안녕하세요.. 기본적인 질문이지만 확인하고 싶어 올려봅니다...
사용하는 PCR kit 는 genescript 사의 제품을 사용하고 있습니다.
총 volumn 50 ul 중 2ul가 template라고 프로토콜에 명시되어 있습니다.
여기서 template를 100ng/ul를 2ul 넣게되면 25배로 희석되니 4ng이 들어가는 것이 맞나요?
하지만 논문에서는 최소 10ng 이 25ul에 들어가야 한다고 하니 2.5*2=5배 양을 더 높이고 D.W. 를 줄이는 것이 맞나요?
학과 선배는 논문에서 명시는 안되어있지만 gDNA를 희석 (1/2~1/10으로)하여 2 ul를 넣어야 한다고 하여.. 혼란을 겪게 되어 질문드립니다.
기본적인 질문 드려서 죄송합니다.
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