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Protein HPLC 분석 관련하여 질문 있습니다
레벨1 name158 (대학원생)
안녕하세요!
단백질 정제 후 HPLC 분석 과정에서 질문이 있어 글 남기게 되었습니다.
저희는 현재 정제한 protein의 purity를 확인하기 위한 목적으로 SEC를 사용하고 있습니다.
2년정도 사용했다는 Tosoh 사의 TSKgel 3000 SWXL column을 사용하다가 동일 모델을 새로 주문하여 교체 하였으며, 컬럼 교체 후 chromatogram이 기울어지는 형태로 나오는 문제가 생겼습니다.
이전과 동일하게 column 사용 전 mobile phase를 평균 1시간~2시간 정도 흘려주어 안정화 시키고 사용하였지만 초반 4~5개 sample을 분석할때까지도 chromatogram이 눈에 띄게 기울어져서 나타납니다.
새 컬럼을 사용하기 전 DW로만 wash하고 사용하였는데, 제조 과정에서 섞여들어간 불순물이 제대로 wash 되지 않았을 가능성이 있을까요?
추가적으로 column에 대한 QC 방법이 궁금합니다!
제조사에 contact 하여 질문하려고 했는데 Tosoh의 한국지사 홈페이지를 찾지 못해 bric에 질문 남겼습니다.
감사합니다!
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