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 전체 > Immunology > ELISA
조회 464  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 ELISA 실험관련
알주드(대학생)  | 07.21 10:45

안녕하세요. 이번에 ELISA 실험을 하게 됐는데

 

실험시간 때문에 질문드립니다.

 

sample 희석과 plate loading을 합쳐서 27분 정도 이내에 끝내야 하는데요.(96well 꽉 채워서)

 

sample 희석은 13분 대정도로 괜찮은데 생각보다 loading에서 시간이 많이 걸리네요..( loading할 때 파이페팅을 너무 느리게 하는 걸까요..? )

 

각 sample 희석과 loading마다 vortexing 해주고 있습니다.

 

생물학 실험 자체가 완전 초짜여서 노하우라든지 그런 게 전혀 없습니다..!

 

저에게 도움을 주세요...!! 감사합니다.

 

 

#ELISA
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123  |  07.21 11:08   

샘플 많으면 하나씩 하시면 너무 번거로워요.

멀티 파이펫이랑 플레이트 셰이커 필요합니다.

멀티 파이펫으로 샘플 넣으면서 파이페팅 하시거나

전체 샘플 로딩하고 플레이트 셰이커에서 믹싱하시는 게 편합니다.

개구리Coolzinc  |  07.21 11:15  

반드시 시간 내에 하셔야하는 이유가 있나요? 

일단 멀티채널 파이펫을 써보세요~

알주드  |  07.21 11:28  

샘플을 1.5ml tube에서 따야 해서 멀티채널을 쓸 수가 없어요..

 

키트 매뉴얼에 샘플을 diluent에 넣고 30분 이내에 로딩하라고 되어 있어서요.

개구리Coolzinc  |  07.21 11:56  

1. 비어있는 U-type 96 well plate를 준비합니다.(F type도 무방) 

2. 1.5ml tube의 샘플을 원래 희석에 사용하는 만큼 미리 1.의 96 well plate에 분주해둡니다. (plate mapping 그대로 맞추어서) 

3. 리저버에  diluent 를 사용량만큼 따른 뒤 멀티채널 파이펫으로 sample 희석에 필요한 만큼 취하여 2.의 sample이 담긴 96 well plate에 넣어 파이펫팅으로 고루 섞어줍니다. 

4. ELISA plate로 희석된 sample을 옮겨줍니다. 

5. 나머지 well은 3.-4. 반복 

이 방법은 어떠신가요? 저라면 키트 매뉴얼의 시간 제한은 무시할 것 같긴 한데 남의 실험이라 그런 말씀은 못 드리겠네요 ㅎㅎ 

알주드  |  07.21 13:55  

저희 방 분들은 다들 그냥 희석 후에 로딩을 하시더라구요..

 

조금 더 고민해보도록 하겠습니다.

 

조언 감사드립니다! 다른 선생님들과 상의해봐야겠어요ㅎㅎ

 

 

개구리ʕ•ﻌ•ʔ뀨  |  07.21 17:23  

샘플 희석은 blocking 끝나기전에 미리 만들어 놓으시고, 

blocking 끝난 후에 loading 바로 진행하시면되요. 

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