실험 Q&A Cell Biology > Cell Culture
HepG2 cell culture morphology
레벨1 박 재홍 (일반인)
안녕하세요, 석사후 연구원으로 한 연구소에서 실험하는 인턴연구생입니다.
현재 이곳 실험실에서 의약 케미컬 제제 세포독성(cytotoxicity) 파트를 맡고있습니다.
세포독성 실험을 위해 HepG2 cell 을 ATCC로부터 구매하여 ATCC에서 권장하는 조건대로 배양하고, 용이한 실험을 위해 배양액 적응을 위한 단계를 밟으려고 합니다.
조건은 다음과 같습니다,
Medium : EMEM + 10% FBS (ATCC) -> DMEM(Low glucose) + 10% FBS (Hyclone)
Seeding : 500,000 cells / 60mm culture plate + 5mL medium
다음과 같은 조건으로 Cell들을 적응시키기 위해서, 10:0, 9:1, ... , 1:9, 0:10 으로 계대배양 때 마다 점점 희석계수를 일정하게 바꾸어 Cell들을 적응시키고자 합니다.
여기서 문제는,
HepG2 세포들이 키우기 쉽지 않고 Doubling time이 48시간이라는 것은 알지만, Proliferation 속도가 너무 느려서 적응력을 평가하기 어렵습니다.
더군다나 Cell이 부착 시 다른 Cell line에 비해 대부분 부착되지 않거나 늦게 부착이 되며, 부착된 후 Cell 외 배양액 내에 다른 부유물(부산물) 들이 떠다니는 듯한 느낌을 많이 받았습니다
현재 조건대로 배양을 진행해도 괜찮을까요?
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