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 전체 > Molecular Biology-RNA > mRNA Analysis
조회 396  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 (qPCR) RNA를 cDNA로 합성시에 정량계산 질문드립니다
알공공펄(대학생)  | 07.13 16:15

안녕하세요 ..! 이번에 처음 RT-PCR을 하게되어서 나노드롭을 찍었는데

RNA 측정값이 247.2ng/ul이 나왔습니다.  cDNA는 1ug, total volume은 14ul로 만들기 위해

D.W와 RNA 계산을 ( 1000/247.2 )-14 로 세웠는데,

2ul기준으로 만들었으니(?) 1000/(247.2*5)을 한다음에 14를 빼주는게 맞아서
최종적으로 RNA 8.09ul+ D.W 5.9ul 이라 하더라고요.

근데 아무리 생각해도 2ul 기준이라는게 뭔소리인지, 왜 5를 곱해줘야되는지를 모르겠어서 질문을 하게되었습니다 ㅜㅜ 제가 놓치고 있는 부분이 무엇인가요...? ㅜㅜ 

#정량계산
 
#cDNA
 
#RNA
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리지나가는 생물학자  |  07.13 16:35  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

작성자분께서 계산하신게 맞습니다.

나노드랍을 1ul로 측정했든 2ul로 측정했든 그 값은 247.2ng/ul 라는 농도를 기준으로 잡아야 하고 1ug을 이용해서 cDNA 합성을 하면 약 4ul를 넣고 물을 10ul을 넣으면 14ul안에 1ug의 RNA가 있는것입니다..

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