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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 HeLa cell counting 하면 이상한게 보이는 데 뭘까요??
올챙이전기영동(대학원생)  | 07.12 11:53

upload_image안녕하세요, 요즘 여러가지 셀을 키워서 WST-8 을 하고 있는데요...

유독 HeLa cell만 counting 하려고 떼서 트립판블루 염색을 해 보면 꼭 이렇게 지저분한 것들이 많더라구요. 같이 계대 및 seeding 한 MCF-7이나 A549, HCT116 같은 것들은 깔끔한 걸 보면 딱히 트립판블루에 문제가 있는 것 같진 않구요...

upload_image이건 sub 하기 전 HeLa cell을 찍은 사진 입니다. 약간 overgrowth 된 부분이 있긴 하지만 저런 이상한 것들이 잔뜩 보이진 않는 것 같아요.

박사님 말씀으로는 저보고 trypsin 처리하고나서 화학적으로 떼야 하는데 물리적으로 니가 팡팡 뚜드리는 바람에 cell이 찢어져서 debris가 생긴 것 같다고 하는데, 저는 트립신 처리하고 배지로 washing 해서 잘 뗐는데...? ㅠㅠ

#HeLa
 
#culture
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456  |  07.12 13:37   

죽은 세포가 뭉쳐진거겠죠.

개구리범수리  |  07.12 17:16  

저런경우에 보통은 Trypan blue가 오래된거라 그런경우가 많기는 한데 다른셀 할때는 없다고 하시니... 잘 안닦고 사용 하신거 아닐까요?

 

cell debris라고 하기에는 저정도로 잘 보이지는 않는게 대부분이라서..trypna blue 섞지말고 셀만으로 카운팅 한번 해보셔요

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