실험 Q&A Cell Biology > Cell Culture
IL-2 사용법 관련 질문드립니다(제발 도와주세요 ㅠㅠ)
레벨2 Derick (과기인)
안녕하세요 선생님들. 불철주야 연구에 매진하시느라 다들 고생 많으십니다.
저는 PBMC 관련 시약 연구, 개발 하고 있는 소상공인 입니다.
어떤 계기로 NK cells 에 관련하여 호기심이 생기기 시작했고,
NK cells 을 배양 해보고 싶은 마음에 관련 논문 및 프로토콜 숙지 후
생전 처음 써보는 IL-2를 겁없이 50㎍ 짜리 두개를 덜컥 구매했습니다.
(제품 : perrotech 사 Recombinant Human IL-2카달로그# 200-02)
-제품 및 IL-2 정보 주신 '지나가는생물학자' 님 감사합니다 :) -
무식하면 용감하다고..ㅠㅠㅠ 나름 관련 공부 한 사람이라는 안일한 생각으로...
구매시 딸려오는 sheet 나 CoA 에 있는 protocol 로 하면 될꺼라는 용기로 시작했는데요.
첫 스탭 부터 막히기 시작하네요ㅠㅠ 각설하고 질문 드립니다.. 도와주세요 선생님들 ㅠ
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제품은 저번 주 에 받고 현 -80(-70set) deep freezer에 넣어놨습니다.
같이온 CoA(sheet) 지 에 있는 Reconstitution 방법에 100mM 의 Acetic Acid 로 녹이는데 0.1-1.0 mg/ml 로 하라고 되어 있습니다. 음... sheet 에 적힌 protocol 은 이게 끝입니다ㅠ
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질문 1번
Sheet 지에 Acetic Acid로 녹이라고 되어 있어서 Perprotech 사에 전화로 문의를 해보니, Acetic Acid로 녹이는게 가장 효율이 좋고, 기타 다른 물질로 녹여서 효과가 안나오는 것은 Claim 처리가 불가하다 라는 답변을 받았습니다.
여러 논문 및 질문 답변 내용은 보통 PBS로 녹이는거 같은데, PBS로 녹여도 상관 없는건가요??
질문2번
최대한 fresh 한 상태의 IL-2 를 사용 하려고 합니다.
50ml 미디어에 한번 넣어줄 만큼 분주 하려고 합니다.
지금 가지고 있는 IL-2의 양은 50㎍ 씩 포장되어 있는 2 바이얼 입니다. (총 100㎍)
하나를 까서 분주 한다고 하고, 50ml 미디어에 한번 넣어줄 만큼씩 IL-2를 분주 한다고 했을때 50㎍ 를 얼마의 PBS 나 Acetic Acid 양으로 녹여야 하고, 얼마의 양으로 분주를 해놔야 할까요? (ml 나 ul 단위로 부탁드립니다.)
NK배양 해보신 선생님들 께서 쓰시는 양 말씀 주시면 감사하겠습니다.
해안을 부탁드립니다 선생님들 ㅠㅠ 감사합니다.
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