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질문 mouse IgE ELISA kit 관련 질문입니다!
올챙이jineee(대학생)  | 2022.07.09 01:04

mouse serum 내 IgE 측정위해 kit 사용하였습니다다

 

첫 시도에서 Sample(10배 희석) 분주 후 흡광도 측정결과 standard 값보다 높게 나와서 200배 희석 후 흡광도 측정했는데 값이 더높게 나왔습니다 왜 이런결과가 나왔는지 kit 내 프로토콜에도 결과 해석이 없더라구요ㅠㅠ 

프로토콜에 샘플 희석 농도에 대한 언급이 없어서 보통 kit 사용시 얼마나 희석을 해야하는지 흡광도 값은 얼마정도 나와야하는건지 궁금합니다!

 

그리고 흡광도 측정시 만약 2.5nm가 나왔다면 sample을 10배 더 희석하면 0.25nm 정도의 흡광도 값을 얻을 수 있을까요?.

#mouse
 
#IgE
 
#Elisa
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
뒷다리이예이  |  2022.07.22   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

serum 에는 target protein 이외에 많은 인자들이 포함되어있기 때문에,이들이 target 이 항체에 반응하는 것을 저해하기도 합니다 (matrix effect).

이 경우, 희석배수를 높이면 결과값이 더 높게 나오기도 하지요.

처음 사용하시는 ELISA kit라면, spiking 을 하셔서 sample의 matrix 에 의해 반응 저해가 없이 recovery가 잘 나오는 희석배수를 먼저 결정하시고 시료를 분석하는 것이 좋겠습니다. 

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